1. Giới thiệu
Lành thương thường được chia thành một quá trình ba giai đoạn – đó là giai đoạn viêm, giai đoạn tăng sinh và giai đoạn tái tạo. Giai đoạn khởi đầu bắt đầu tại thời điểm bị thương và kéo dài từ 24 đến 48 giờ. Trong quá trình này, một sự tương tác động xảy ra giữa các tế bào nội mô, các cytokine tạo mạch và chất nền ngoại bào (ECM), nơi việc phân phối nhiều yếu tố tăng trưởng theo cách được kiểm soát tốt nhằm mục đích đẩy nhanh quá trình chữa lành vết thương. Nói chung, máu cung cấp các sản phẩm điều trị thiết yếu bao gồm cả sản phẩm tế bào và protein mà không thể lấy được từ các nguồn khác. Một khi vết thương xảy ra, máu bắt đầu đông lại trong vòng vài phút để cầm máu. Một trong những tế bào quan trọng trong các giai đoạn này là tiểu cầu đã được chứng minh là chất điều hòa quan trọng của quá trình cầm máu thông qua sự hình thành cục máu đông fibrin. Tiểu cầu giải phóng các cytokine và các yếu tố tăng trưởng để thu hút các đại thực bào và bạch cầu trung tính đến các vị trí bị thương; sau đó các mảnh vụn, mô hoại tử và vi khuẩn từ vết thương có thể được loại bỏ. Đến ngày thứ 3, giai đoạn tăng sinh bắt đầu và cục máu đông bên trong vết thương được cung cấp thêm chất nền tạm thời để di chuyển tế bào, đồng thời cục máu đông trong lòng mạch góp phần cầm máu. Các nguyên bào sợi bắt đầu sản xuất collagen theo một thứ tự ngẫu nhiên, và sau đó quá trình hình thành mạch xảy ra đồng thời khi vết thương dần bắt đầu có được sự ổn định ban đầu. Trong giai đoạn tái tạo cuối cùng, collagen được thay thế bằng các fibrils collagen có tổ chức giúp tăng cường sức mạnh cho vị trí bị thương, nơi diễn ra quá trình tái tạo mô (Hình 2.1).
Máu chủ yếu bao gồm bốn thành phần: huyết tương, hồng cầu, bạch cầu và tiểu cầu. Đặc biệt, tiểu cầu được cho là thành phần chịu trách nhiệm cho việc kích hoạt và giải phóng các yếu tố tăng trưởng quan trọng bao gồm yếu tố tăng trưởng có nguồn gốc từ tiểu cầu (PDGF), yếu tố đông máu, phân tử kết dính, cytokine và các yếu tố tạo mạch, cho phép kết tập và hoạt động của nguyên bào, bạch cầu, đại thực bào và tế bào gốc trung mô (MSC). Các yếu tố đông máu, yếu tố tăng trưởng và cytokine được giải phóng trong cục máu đông bởi các tiểu cầu hoạt hóa các sự kiện sinh lý phức tạp dẫn đến sửa chữa mô, tái tạo mạch máu và tái tạo mô.
2. Các thành phần tế bào của PRF
Liệu pháp cô đặc tiểu cầu đã được phát triển để đẩy nhanh tiềm năng tái tạo của các tiểu cầu trong máu một cách tự nhiên. PRF được xây dựng bằng cách tách máu sau khi ly tâm thành các thành phần khác nhau bao gồm hồng cầu, huyết tương, bạch cầu và tiểu cầu. PRF có nguồn gốc tự nhiên trong máu là sự tập trung của các tế bào bạch cầu, tiểu cầu và fibrin. Người ta đã chỉ ra rằng các chất cô đặc PRF (còn gọi là L-PRF) được phát triển ban đầu chứa 97% tiểu cầu và hơn 50% bạch cầu trong một mạng lưới fibrin mật độ cao khi so sánh với máu toàn phần. Các biến thể của PRF chủ yếu là gel hoặc đặc và không thể được tiêm vào mặc dù gần đây việc phát triển PRF dạng lỏng có thể tiêm được tạo ra bằng cách sử dụng lực ly tâm thấp hơn trong khoảng thời gian ngắn hơn. Hơn nữa, sử dụng “ly tâm tốc độ thấp” đã chứng minh rằng các chế phẩm mới hơn của PRF (hiện được gọi là PRF tiên tiến hoặc A-PRF) cũng có thể làm tăng lượng tiểu cầu và bạch cầu hạt trung tính trong cục máu đông PRF và kéo dài thời gian giải phóng một số các yếu tố tăng trưởng.
Bạch cầu là loại tế bào chính khác được tìm thấy trong PRF, đóng một vai trò quan trọng trong việc chữa lành vết thương. Điều thú vị là các nghiên cứu từ khoa học cơ bản đã tiết lộ tác động mạnh mẽ và lớn của bạch cầu trong quá trình tái tạo mô. PRF chứa số lượng bạch cầu cao hơn khi so sánh với các chất cô đặc tiểu cầu thế hệ thứ nhất – PRP và PRGF. Số lượng bạch cầu trong PRF đã được xác định vào khoảng 50% (với sự thay đổi tùy thuộc vào người hiến tặng) và các công thức mới hơn đã cho thấy sự cải thiện hơn nữa về tổng số lượng bạch cầu. Bạch cầu là những tế bào đóng vai trò quan trọng trong việc chữa lành vết thương do hoạt động chống nhiễm trùng cũng như điều hòa miễn dịch thông qua việc tiết ra các cytokine miễn dịch quan trọng như interleukin (IL) -1β, IL-6, IL-4 và TNF-α. Trong khi vai trò của chúng trong miễn dịch được đặc trưng rõ ràng, chúng cũng phục vụ chức năng như các cơ quan điều tiết, kiểm soát khả năng vật liệu thích nghi với môi trường vật chủ mới. Trong một nghiên cứu trước đây, một trong những điểm kết hợp thú vị khi định lượng tế bào là phần lớn bạch cầu được tìm thấy gần đáy của cục máu đông fibrin. Dựa trên sự liên kết này, rõ ràng là tốc độ ly tâm (lực g) quá cao đẩy bạch cầu xuống đáy ống ly tâm. Để phân phối lại số lượng tế bào bạch cầu trên toàn bộ mạng lưới PRF, tốc độ ly tâm thấp hơn đã được nghiên cứu. Vì các đại thực bào cung cấp một nguồn liên tục các tác nhân hóa học cần thiết để kích thích quá trình tạo fibrin và hình thành mạch, nguyên bào sợi tạo ra ECM mới cần thiết để hỗ trợ sự phát triển của tế bào, các công thức mới hơn của PRF (A-PRF, i-PRF) do đó ngày càng có hoạt tính sinh học cao hơn.
3. Ưu điểm của mạng fibrin ba chiều
Fibrin là dạng hoạt hóa của một phân tử plasmatic được gọi là fibrinogen. Sự kết hợp các đặc tính bao gồm các tế bào và các yếu tố tăng trưởng trong một ma trận fibrin ba chiều trong PRF có tác dụng hiệp đồng dẫn đến sự gia tăng nhanh chóng và mạnh mẽ trong quá trình tái tạo mô. Phân tử fibrillary hòa tan này hiện diện ồ ạt cả trong huyết tương và trong các hạt α, là loại hạt có nhiều tiểu cầu nhất. Fibrin đóng vai trò quyết định trong quá trình kết tập tiểu cầu trong quá trình cầm máu. Người ta đã báo cáo rằng chỉ riêng fibrin (không có yếu tố tăng trưởng hoặc tế bào sống) có thể hoạt động như một chất nền tạm thời cho phép xâm nhập tế bào và tái tạo mô. Do đó, PRF có nhiều lợi thế vì nó bao gồm sự tập hợp các cytokine, chuỗi glycanic và glycoprotein cấu trúc nằm trong một mạng lưới fibrin được polyme hóa chậm. Các yếu tố tăng trưởng bị mắc kẹt trong ECM, cho phép di chuyển, phân chia và thay đổi kiểu hình của các tế bào nội mô, do đó dẫn đến hình thành mạch. Bản thân mạng lưới PRF đã được xác định là một mạng ba chiều sinh học. Các vi bào tử bao gồm các sợi fibrin mỏng hình thành bên trong các cục máu đông và có thể hoạt động như các mạng lưới để TB xâm nhập, tăng sinh và phân chia cũng như phân phối các yếu tố tăng trưởng. Về mặt lý thuyết, tiểu cầu bị giữ lại một cách ồ ạt trong mạng lưới fibrin và giữ các yếu tố tăng trưởng nằm trong lưới PRF ba chiều này, sau đó là sự giải phóng chậm và từ từ của các yếu tố tăng trưởng theo thời gian. Cục máu đông cũng cung cấp một mạng lưới để tập hợp các tế bào đến vị trí bị thương. Cụ thể, fibrin kết hợp với fibronectin hoạt động như một chất nền tạm thời cho các tế bào đơn nhân, nguyên bào sợi và tế bào nội mô. Tóm lại, những hạn chế ban đầu của PRP đã dẫn đến sự xuất hiện của chất cô đặc tiểu cầu thế hệ thứ hai, không có chất chống đông máu, một mạng lưới fibrin có đầy đủ các yếu tố tăng trưởng bị bắt lại được giải phóng từ từ theo thời gian một cách tự nhiên. Gần đây, các báo cáo đã tiết lộ rằng các tế bào gốc tồn tại tự nhiên trong mạch máu (tế bào gốc trung mô (MSC)) góp phần thúc đẩy quá trình chữa lành vết thương trực tiếp. Mặc dù được tìm thấy với hàm lượng cực thấp, nhưng MSC có khả năng tự chuyển hóa thành tế bào mỡ, nguyên bào xương và tế bào chondrocytes. MSCs cũng biểu hiện một số yếu tố tăng trưởng, bao gồm yếu tố tăng trưởng nguyên bào sợi 2 (FGF-2) và yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (VEGF), thúc đẩy sự gia tăng của tế bào nội mô mạch máu, ổn định mạch máu và phát triển mạng lưới mạch máu lâu dài. Nghiên cứu trong tương lai điều tra tác động của MSCs trong máu là cần thiết. Mặc dù PRF không chứa MSC với số lượng lớn, nhưng nó có thể đại diện cho một chiến lược tiềm năng trong tương lai để cô lập MSC tương đối dễ dàng với chi phí thấp.
4. Các yếu tố tăng trưởng trong máu
Điều quan trọng là phải hiểu rằng viêm và chữa lành vết thương được kiểm soát dưới sự điều tiết cao bởi một loạt các yếu tố tăng trưởng. Các yếu tố tăng trưởng có thể kích thích hoặc ức chế sự di chuyển, kết dính, tăng sinh và biệt hóa của tế bào. Trong khi các yếu tố tăng trưởng tồn tại trong tất cả các mô, điều quan trọng cần lưu ý là máu đóng vai trò là nguồn dự trữ chính của nhiều yếu tố tăng trưởng và các cytokine thúc đẩy hình thành mạch và tái tạo mô để chữa lành vết thương. Các yếu tố tăng trưởng thường tồn tại dưới dạng tiền chất không hoạt động hoặc hoạt động một phần yêu cầu kích hoạt phân giải protein và có thể yêu cầu liên kết với các phân tử nền để hoạt động hoặc ổn định. Các yếu tố tăng trưởng cũng thường có thời gian bán hủy sinh học ngắn. Ví dụ, yếu tố tăng trưởng do tiểu cầu (PDGF) có thời gian bán hủy dưới 2 phút khi được tiêm vào tĩnh mạch. Vì nhiều quá trình tế bào đòi hỏi một mạng lưới phức tạp gồm nhiều con đường tín hiệu và thường có nhiều hơn một yếu tố tăng trưởng, nên nghiên cứu gần đây đã tập trung vào các kế hoạch phân phối tuần tự nhiều yếu tố tăng trưởng. Không giống như các yếu tố tăng trưởng tái tổ hợp, tiểu cầu cô đặc tạo cơ hội để cung cấp đồng thời nhiều yếu tố tăng trưởng tự thân. Tiểu cầu và đại thực bào giải phóng rất nhiều yếu tố bao gồm yếu tố tăng trưởng biến đổi beta-1 (TGF-β1), PDGF, yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (VEGF), yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF) và yếu tố tăng trưởng giống insulin (IGF).
TGF-β1: Yếu tố tăng trưởng biến đổi β (TGF-β) là dòng hơn 30 loại được mô tả trong tài liệu là tác nhân xơ hóa. Tiểu cầu được biết đến là nguồn sản xuất TGF-β chính. Vai trò của TGF-β làm trung gian sửa chữa mô, điều hòa miễn dịch và tổng hợp chất nền ngoại bào. Các protein di truyền hình thái xương (BMPs) cũng là một phần của phân họ TGF. TGF-β1, dạng đồng dạng chủ yếu, rất quan trọng trong việc chữa lành vết thương, với vai trò trong tạo mạch, hình thành mạch, tái tạo biểu mô và tái tạo mô liên kết. Yếu tố tăng trưởng này rất quan trọng trong quá trình hình thành xương, góp phần tạo nên tiền nguyên bào tạo xương trong quá trình hóa học và tạo phân bào, đồng thời kích thích sự lắng đọng nguyên bào xương của mô khoáng trên mạng lưới collagen của xương. Người ta cũng báo cáo rằng TGF-β1 có thể điều chỉnh VEGF, do đó tạo điều kiện thuận lợi cho quá trình hình thành mạch tập trung TB viêm. Mặc dù đặc điểm của nó về mặt tăng sinh rất khác nhau, nhưng đối với phần lớn các loại tế bào, nó tạo thành tác nhân gây xơ hóa mạnh nhất trong số tất cả các cytokine và yếu tố tăng trưởng thường được giải phóng từ xương tự sinh trong quá trình sửa chữa và tái tạo mô.
PDGF: Các yếu tố tăng trưởng có nguồn gốc từ tiểu cầu (PDGFs) là những chất điều hòa cần thiết cho sự xâm nhập, tăng sinh và tồn tại của các dòng tế bào trung mô và thúc đẩy sản xuất collagen để tái tạo ECM trong quá trình chữa lành vết thương. Tiểu cầu là nguồn chính của PDGF với nhiều nhóm khác nhau được chia thành đồng loại (PDGF-AA, PDGF-BB, PDGF-CC và PDGF-DD) và polypeptit dị phân tử (PDGFAB) được liên kết bằng liên kết disunfua. Chúng hiện diện với số lượng lớn trong các hạt α tiểu cầu. Điều thú vị là PDGF được tích lũy với số lượng lớn trong ma trận PRF và được coi là một trong những phân tử quan trọng được giải phóng theo thời gian từ PRF. Điều quan trọng cần lưu ý là vì PDGF có thời gian bán hủy cực kỳ ngắn, nên mạng PRF hoạt động để hỗ trợ quá trình giải phóng chậm và dần dần của nó theo thời gian. PDGF cũng là một mitogen chính cho nguyên bào xương và tế bào tạo cốt bào không biệt hóa, nguyên bào sợi, tế bào cơ trơn và tế bào thần kinh đệm. Vì nó đóng một vai trò quan trọng trong cơ chế chữa bệnh sinh lý, một nguồn tái tổ hợp có sẵn (rhPDGF-BB) đã được bán sau khi nhận được sự chấp thuận của FDA để tái tạo các khiếm khuyết khác nhau trong y và nha khoa.
VEGF: Yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (VEGF) được tiết ra bởi các tế bào huyết khối và đại thực bào đã hoạt hóa đến các vị trí bị tổn thương để thúc đẩy quá trình hình thành mạch. Họ VEGF có liên quan đến PDGF, và bao gồm VEGFA, -B, -C, -D và -E. VEGF trước đây đã được phân lập và được mô tả là yếu tố tăng trưởng mạnh nhất dẫn đến sự hình thành mạch của các mô, kích thích sự hình thành mạch máu mới và do đó, để đưa chất dinh dưỡng và tăng lượng máu đến vị trí bị thương. Nó có tác dụng mạnh mẽ trong việc tái tạo mô và việc kết hợp VEGF tái tổ hợp của con người vào các vật liệu sinh học xương khác nhau đã được chứng minh là tăng sự hình thành xương mới, tác dụng nhanh và mạnh.
EGF: Họ EGF kích thích quá trình hóa học và tạo mạch của tế bào nội mô và nguyên phân của tế bào trung mô. Nó tiếp tục tăng cường biểu mô hóa và rút ngắn rõ rệt quá trình lành thương tổng thể khi sử dụng. EGF được điều tiết sau chấn thương cấp tính và có tác dụng làm tăng đáng kể độ bền kéo của vết thương. Thụ thể EGF được biểu hiện trên hầu hết các loại tế bào của con người, bao gồm cả những tế bào đóng vai trò quan trọng trong quá trình sửa chữa vết thương như nguyên bào sợi, tế bào nội mô và tế bào sừng.
IGF: Các yếu tố tăng trưởng giống insulin (IGFs) là những chất điều hòa tích cực sự tăng sinh và biệt hóa của hầu hết các loại tế bào, chúng hoạt động như những chất bảo vệ tế bào. Yếu tố tăng trưởng này được giải phóng từ các tiểu cầu trong quá trình hoạt hóa và phân hủy của chúng, đồng thời kích thích sự phân bào và phân bào của các tế bào trung mô. Mặc dù IGF là chất trung gian tăng sinh tế bào, nhưng chúng cũng tạo thành trục chính của quá trình điều hòa quá trình chết theo chương trình của tế bào, bằng cách tạo ra các tín hiệu sống sót bảo vệ tế bào khỏi nhiều kích thích chết theo chương trình.
5. Giải phóng yếu tố tăng trưởng của PRP so với PRF
Các yếu tố tăng trưởng được giải phóng là một chủ đề nghiên cứu quan trọng và được tranh luận nhiều trong những năm qua. Có những khác biệt đáng kể giữa PRP và PRF. Sự phát triển của PRF cho phép kiểm soát và làm giàu các yếu tố tăng trưởng từ các chất cô đặc tiểu cầu bằng cách giải phóng các yếu tố tăng trưởng chậm hơn và dần dần theo thời gian. Thực tế là thế hệ tiểu cầu cô đặc thứ hai này chứa các bạch cầu trong chất nền fibrin cho phép tăng cường giải phóng các yếu tố tăng trưởng liên quan đến quá trình tái tạo mô. Giải phóng các yếu tố tăng trưởng từ ba loại tiểu cầu cô đặc khác nhau bao gồm PRP, L-PRF, A-PRF đã được báo cáo bởi Kobayashi et al. (Hình 2.3 và 2.4).
PRF (L-PRF và A-PRF) giải phóng tổng lượng yếu tố tăng trưởng cao hơn khi so sánh với PRP trong khoảng thời gian 10 ngày. Để mô tả chính xác sự giải phóng yếu tố tăng trưởng trong một khoảng thời gian dài, nhóm nghiên cứu của chúng tôi đã phân tích các loại protein phổ biến trong máu bao gồm PDGF-AA, -AB và -BB tại mỗi giai đoạn sớm và muộn bao gồm 15 phút, 60 phút, 8 giờ, 24 giờ, 3 ngày và 10 ngày (Hình 2.3). Điều thú vị là ở thời điểm sớm (15 phút), mức độ PDGF-AA cao hơn đáng kể được giải phóng từ PRP khi so sánh với L-PRF hoặc A-PRF, trong khi mức độ thấp hơn đáng kể được quan sát thấy ở phút 60 chứng tỏ rằng PRP giải phóng nhanh chóng PDGF- AA từ 0 đến 15 phút và sau đó phóng thích ít hơn đáng kể so với PRF lên đến 10 ngày (Hình 2.3). Mặc dù không có sự khác biệt đáng kể nào ở các thời điểm ban đầu được phát hiện giữa A-PRF và L-PRF (tối đa 1 ngày), vào 3 ngày A-PRF cho thấy sự giải phóng yếu tố tăng trưởng của PDGF-AA cao hơn đáng kể khi so sánh với PRP và L-PRF (Hình 2.3).
Hơn nữa, tổng số protein tích lũy PDGF-AA của PRP cho thấy mức thấp đáng kể từ 8 giờ cho đến 10 ngày, trong khi ngược lại, mức cao hơn đáng kể được phát hiện đối với A-PRF từ 1 đến 10 ngày khi so sánh với PRP và PRF (Hình 2.3). Hơn nữa, PDGFAA được giải phóng từ tất cả các tiểu cầu cô đặc ở nồng độ cao hơn từ 6 đến 10 lần khi so sánh với PDGF-AB và PDGF-BB. Các xu hướng tương tự cũng được quan sát thấy đối với PDGF-AB và PDGF-BB. Sự giải phóng TGF-β1 và VEGF cũng được tính toán và một xu hướng tương tự cũng được quan sát, theo đó PRP thúc đẩy sự giải phóng sớm các yếu tố tăng trưởng ở 15 phút và 8 giờ khi so sánh với PRF (L-PRF hoặc A-PRF) (Hình 2.4). Sau đó, mức PRP giảm đáng kể và cả L-PRF và A-PRF tiêu chuẩn đều cho thấy mức độ cao đáng kể của cả nồng độ TGF-β1 và VEGF. Song song với kết quả thu được với PDGF, tổng lượng protein giải phóng cao nhất đáng kể đối với A-PRF ở 3 và 10 ngày đối với TGF-β1, và 1, 3 và 10 ngày đối với VEGF khi so sánh với PRP và L-PRF. Nhìn chung, việc giải phóng EGF và IGF có số lượng thấp hơn khi so sánh với nồng độ PDGF, TGF-β1 và VEGF. Các xu hướng khác nhau đã được quan sát thấy giữa các cấu hình giải phóng của EGF và IGF [14]. Tổng số protein tích lũy cho thấy tổng lượng EGF cao nhất đối với A-PRF và thấp nhất là PRP. Hơn nữa, mức IGF cao hơn đáng kể được quan sát thấy đối với PRP ở 15 phút, 60 phút và 8 giờ so với PRF. Nhìn chung, PRP có thể được khuyến nghị để tạo nhanh các yếu tố tăng trưởng, trong khi A-PRF phù hợp hơn để phân phối dài hạn trong khoảng thời gian 10 ngày.
6. L-PRF so với A-PRF và A-PRF + – những phát hiện mới về khái niệm ly tâm tốc độ thấp và thời gian thấp giúp giải phóng yếu tố tăng trưởng thậm chí cao hơn
Việc giải phóng dần dần các yếu tố tăng trưởng vào các mô xung quanh của chúng thường được gọi là các yếu tố thích hợp cho sửa chữa mô. Một điều đáng chú ý là sự phát triển của khái niệm ly tâm tốc độ, tiêu chuẩn L-PRF đã được cải tiến hơn nữa để hỗ trợ giải phóng nhiều yếu tố tăng trưởng hơn trong A-PRF và A-PRF+. Nó đã được báo cáo bởi Ghanaati et al. vào năm 2014, các TB trong mạng lưới PRF ban đầu đã được tìm thấy một cách đáng ngạc nhiên ở đáy mạng lưới PRF. Về nguyên tắc, thời gian ly tâm ít hơn sẽ làm giảm lực kéo của tế bào xuống bởi lực ly tâm, điều này làm tăng tổng số tế bào còn lại trong lớp trên cùng của PRF, tạo điều kiện cho số lượng bạch cầu “mắc kẹt” trong ma trận fibrin cao hơn. Trong nghiên cứu thứ hai của nhóm chúng tôi, công thức mới hơn của A-PRF (A-PRF +, không chỉ có tốc độ ly tâm thấp hơn mà còn có thời gian — 1300 vòng / phút trong 8 phút) đã được chứng minh là làm tăng giải phóng yếu tố tăng trưởng của TGF-beta1, PDGF-AA, PDGF-AB, PDGFBB, VEGF, IGF và EGF (Hình 2.5 và 2.6). Sự giải phóng các yếu tố tăng trưởng bao gồm PDGF-AA, -AB và -BB được thể hiện trong Hình 2.5. Trong khi các xu hướng hơi khác nhau giữa tất cả các yếu tố tăng trưởng được điều tra, A-PRF + đã chứng minh sự gia tăng đáng kể trong việc giải phóng yếu tố tăng trưởng vào 1, 3 hoặc 10 ngày khi so sánh với tất cả các nhóm khác. L-PRF cho thấy giá trị thấp hơn đáng kể khi so sánh A-PRF và A-PRF + (Hình 2.5).
Do đó, kết luận rằng tổng số yếu tố tăng trưởng giải phóng có thể được tăng cường bằng cách giảm cả tốc độ và thời gian ly tâm trong A-PRF +. Việc giải phóng TGF-β1 cũng cho thấy một xu hướng tương tự, theo đó A-PRF + thể hiện các giá trị cao nhất đáng kể vào thời điểm 1, 3 và 10 ngày và tổng giải phóng các yếu tố tăng trưởng sau khoảng thời gian 10 ngày cao hơn gần 3 lần khi so sánh với L -PRF (Hình 2.6). Điều thú vị là A-PRF + đã chứng minh sự giải phóng VEGF cao hơn ở thời điểm sớm 1 ngày; tuy nhiên, ít thay đổi được quan sát thấy trong tổng số lượng thả sau 10 ngày (Hình 2.6). EGF và IGF-1 khẳng định thêm rằng ly tâm tốc độ thấp giúp giải phóng cả hai yếu tố tăng trưởng từ A-PRF + khi so sánh với A-PRF và L-PRF [24]. Nhìn chung, tốc độ và thời gian ly tâm thấp hơn (A-PRF, A-PRF +) cho thấy sự gia tăng đáng kể trong việc giải phóng yếu tố tăng trưởng của PDGF, TGF-β1, EGF và IGF với A-PRF + là cao nhất trong tất cả các nhóm.
7. i-PRF so với PRP — giải phóng yếu tố tăng trưởng
Vì PRP có bản chất là chất lỏng, nên ban đầu người ta đề xuất rằng PRP được kết hợp với các vật liệu sinh học xương khác nhau, đáng chú ý nhất là vật liệu xương ghép. Dữ liệu gần đây đã báo cáo rằng việc giải phóng yếu tố tăng trưởng với PRP được tiết ra rất sớm trong giai đoạn phân phối, trong khi ưu tiên sẽ là cung cấp các yếu tố tăng trưởng trong một khoảng thời gian dài trong toàn bộ giai đoạn tái tạo. Hơn nữa, kỹ thuật điều chế PRP đòi hỏi phải sử dụng thêm thrombin hoặc CaCl2 của bò ngoài các yếu tố đông máu, dẫn đến giảm khả năng lành thương. Trong một số trường hợp, toàn bộ quy trình để chuẩn bị PRP cần nhiều giai đoạn phân tách kéo dài tới 1 giờ, khiến nó không khoa học cho các mục đích y tế. Vì những lý do này, i-PRF đã được phát triển như một PRF lỏng bằng cách hút máu nhanh chóng trong một ống ly tâm đặc biệt ở tốc độ rất thấp 700 vòng / phút (60 g) trong thời gian ly tâm thậm chí còn ngắn hơn (3 phút) với một chu kỳ ly tâm. I-PRF phải được sử dụng trong vòng 15 phút sau khi thu thập do thực tế là nó không chứa chất chống đông máu và do đó có thể đông tụ trong một khoảng thời gian ngắn. Công thức mới này có thể được sử dụng cho nhiều quy trình bao gồm trộn với xương ghép để tạo thành mảnh ghép xương fibrin ổn định để cải thiện việc xử lý nhằm cải thiện độ ổn định của mảnh ghép. Nguyên tắc của i-PRF vẫn giữ nguyên – nó chứa một tỷ lệ bạch cầu và protein huyết tương lớn hơn do tốc độ và thời gian ly tâm thấp hơn. Việc giải phóng các yếu tố tăng trưởng từ PRP và i-PRF đã được so sánh trong một nghiên cứu thứ ba của nhóm chúng tôi như được mô tả trong Hình 2.7.
Trong khi tất cả các yếu tố tăng trưởng được điều tra cho thấy sự phóng thích sớm (15 phút) từ PRP cao hơn đáng kể khi so sánh với i-PRF, tổng sự giải phóng của các yếu tố tăng trưởng cho thấy PDGF-AA, PDGF-AB, EGF và IGF-1 đều được giải phóng cao hơn mức từ i-PRF khi so sánh với PRP (Hình 2.7, dữ liệu không được hiển thị). Tuy nhiên, điều thú vị là tổng giải phóng hệ số tăng trưởng của PDGF-BB, VEGF và TGF-β1 trong PRP cao hơn đáng kể so với i-PRF. Có thể giả thuyết rằng sự khác nhau trong các giao thức quay được cho là đã thu thập các quần thể tế bào khác nhau một chút và / hoặc tổng các yếu tố tăng trưởng chịu trách nhiệm cho các biến thể giải phóng theo thời gian. Ưu điểm của i-PRF là nó vẫn là một sản phẩm tự thân 100% với lợi ích là hình thành cục máu đông fibrin trong khi duy trì giải phóng yếu tố tăng trưởng tương đương với PRP
Nguồn: Miron, R. J., & Choukroun, J. (2017). Platelet rich fibrin in regenerative dentistry: Biological background and clinical indications. John Wiley & Sons Ltd.